人类免疫缺陷病毒抗体口腔粘膜渗出液诊断试剂盒(胶体金法)是基于免疫层析技术通过手工操作、肉眼读取结果、20分钟即可定性(阴性/阳性)得出检测结果的快速诊断试剂,用于检测口腔粘膜渗出液样本中的HIV-1型和HIV-2型抗体。口腔样本中HIV抗体的浓度是血液样本浓度的1/1000。本品主要由检测试纸条,样本缓冲液以及采集样本的口腔拭子组成。本试验是利用侧向流动免疫反应的原理进行的。
在硝酸纤维素膜的检测区包被了HIV-1 gp41和HIV-2 gp36重组抗原,在对照区包被了羊抗人IgG F(ab’)2片断多抗。检测时,用口腔拭子擦拭受试者的上、下牙龈线,然后将口腔拭子放入盛有约1000 μl样本缓冲液的试管里,在试管内混合均匀,将口腔拭子内的液体挤干后,扔掉拭子。将大约200 μl的样本混合液转移到洁净的试管里进行检测。
将检测试纸条垂直插入装有样本混合液的试管里,试纸上的淡红色蛋白A-胶体金标记物会溶解,样本中的IgG(样本中其他抗体如IgA、IgM的反应原理与IgG相同)同蛋白A/胶体金粒子结合在一起,形成“IgG-蛋白A-金”复合物,“IgG-蛋白A-金”复合物沿着试纸条向上方移动,首先到达包被了HIV抗原的检测区。如果样本中含有HIV的抗体,“IgG-蛋白A-金”复合物将同抗原结合,并在检测线上滞留下来,形成一条淡红色的线,这表示阳性结果。线条颜色的深浅同样本中的抗体数量没有比例关系。
检测区里如果没有带颜色的线条表示样本中不含HIV抗体,游离的“IgG-蛋白A-金”复合物继续向试纸上方移动,到达试纸的对照区。对照区包被了羊抗人IgG F(ab’)2片断,固定在试纸条的对照线上。“IgG-蛋白A-金”复合物将同羊抗人IgG F(ab’)2片断结合在一起而富集在对照线上,形成一条淡红色的线。对照线的出现证明试纸条检测功能正常。无论样本中是否含有HIV-1/2抗体,在有效试验中,试纸条的对照区都应当出现淡红至紫色的对照线。样本继续移动,通过对照区进入吸收区。吸收区的作用是吸附剩余的“IgG-蛋白A-金”复合物,使其在试纸条内移动,并消除本底的颜色。
自试纸条插入稀释后的样本混合液起计时,20分钟后方可读取结果.
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(实习编辑:吴春丽)
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